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莫愁前路無知己 天下誰人不識君——Implen NanoPhotometer微量紫外可見光度計隆重上線

時間:2022-05-25 來源: 瀏覽量:383

       2003年,當美國NanoDrop Technologies Inc.公司首款微量紫外可見分光光度計NanoDrop 1000成功上市時,德國人馬丁·薩希里(Martin Sahiri)和托馬斯·薩希里(Dr. Thomas Sahiri)在德國著名的生物工程學技術、軟件服務中心慕尼黑創辦了Implen。3年后,具有超低體積液體樣品分析功能的第一代NanoPhotometer微量紫外可見分光光度計(NanoPhotometer microvolume UV/Vis spectrophotometer)研發成功。

       如今,Implen NanoPhotometer系列微量紫外可見光度計已被全球最負盛名的生物技術公司、化學和制藥公司及研究機構引入,實驗數據被數千份科學出版物引用。PubMed數據查詢結果顯示,2006.01 - 2022.05期間,采用了NanoPhotometer測試結果、可公開查詢到原文的論文數量達3363篇。其中,包括了Nat Commun 50篇(2015-2022),Nucleic Acids Res 24篇(2014-2022),Nature 3篇(2013/2017/2021),Plant Cell 7篇(2010-2022),Proc Natl Acad Sci USA 12篇(2011-2022),Sci Adv 12篇(2017-2022),Mol Cell 2篇(2020),Nat Chem Biol 2篇(2017)。此外,還有Nat Genet(2013),Nat Med(2018),Nat Microbiol(2019),Nat Neurosci(2013),Nat Protoc(2019)、Nat Struct Mol Biol(2018)各1篇。

       在NanoDrop品牌影響力如日中天、市場占有率均絕對領先(發文數量超過4.1萬)的背景下,NanoPhotometrer能生根發芽、并逆襲成長為如今體量,實屬不易。那Implen公司到底有何核心專利技術還能打動人心?

       這項炫酷的技術就是樣品壓縮技術(Sample Compression Technology?)。

                                              

Implen NanoPhotometrer微量紫外可見光度計樣品測定原理.jpg

      

       如圖所示,所謂的樣品壓縮,即在上、下兩個石英玻璃表面之間,對微小液滴擠壓,把液珠由初始的小圓珠變成圓餅、薄膜。從樣品基座中射出的測試光束穿透液體層到達頂蓋,被石英鏡面反射,原路折返而再次穿過液體層、底座光學窗口,并最終傳導至信號檢測器而完成樣品的檢測。其測試光路的長度(Path Lengths, 光程)等于上、下兩個石英界面距離的2倍。

       Implen的十二道微量紫外可見光度計NanoPhotometer N120工作時,2 μL液滴可被壓縮到0.0625 mm的厚度(0.125mm測試光程模式),而NanoPhotometer NP80、N60和N50 三款機型的NanoVolume測定時,可將0.3 μL樣品液壓薄至0.035 mm(0.07mm測試光程模式)。

       要保證NanoPhotometer測試精準,光程的準確控制是關鍵。

       NanoPhotometer采用的是電磁驅動的固定錨點定位技術(True Path Technology?)。檢測基座工作時只能在限定的2個固定位置???,而別無其他??奎c可以停泊。這樣確?;c反射鏡面間的工作距離只能是儀器的兩個預設值之一,防止因機械驅動誤差所致的間距偏差和漂移。

Implen NanoPhotometer NP80與NanoDrop One C光程和測試性能對比

型號

Implen NanoPhotometer   NP80

NanoDrop One C

微量測試模塊

測試上樣體積

0.3 - 2 μL

1.0 - 2 μL

樣品測試時長

5 secs

8 secs

最長測試光程

0.67 mm

1.0 mm

最短測試光程

0.07 mm

0.03 mm

樣品濃度范圍

dsDNA: 1 - 16500   ng/μL

BSA: 0.03 - 478   mg/mL

dsDNA: 2.0 -   27500 ng/μL

BSA: 0.06 - 820   mg/mL

測試準確度

< 1.75% @0.7A   (280nm)

3% at 0.97A (302   nm)

測試重復性

CV< 1% @0.3 -1.7A   (280 nm)

CV< 1%@0.002A   (1.0mm path)

比色皿模塊

測試濃度范圍

dsDNA:0.1 - 130 ng/μL

BSA:0.003 - 3.7 mg/mL

dsDNA:0.20 - 75 ng/μL

BSA:0.13 - 49.5 ng/μL

測定范圍

0 - 2.6 A

0 - 1.5 A

控溫范圍

37 ± 0.5℃

37℃

       對比顯示:在最長光程模式下,NanoPhotometer NP80測定樣品濃度的下限指標優于NanoDrop One C;而在最短光程模式下,NanoDrop One C光程更短,因此可測定的樣品濃度的上限要高于NanoPhotometer NP80的測定極限。

       這兩套系統的測試過程都具有光程自動調節功能。NanoDrop One C為0.03mm/0.05mm/0.1mm/0.2mm/01mm五檔光程自動掃描測定,而NanoPhotometer NP80為0.67mm/0.07mm雙光程掃描檢測,因此,單個樣品測試處理時間,NanoDrop One C要比NanoPhotometer NP80長3秒鐘。

       NanoDrop在最長光程模式下測定時,需借助于液體自身足夠的表面張力強度,以確保樣品液柱形態保持穩定和測試數據的有效性。而經脫鹽純化處理后的蛋白溶液、非極性溶劑、SDS等去污劑殘留或樣品溫度升高等,均可導致液體表面張力的降低,故可能會影響到樣品測試的準確性。

       此外,為維持檢測基座的疏水性能,NanoDrop官方操作規程要求定期采用PR-1基座表面修復試劑盒對基座進行表面修復。而NanoPhotometer NP80的測定過程無需液體表面張力參與光程的控制,也就無須對石英基座表面疏水狀態進行維護的必要性。因此,NanoPhotometer NP80的使用維護管理要更輕松。

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